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通過(guò)COA報(bào)告如何對(duì)血清進(jìn)行質(zhì)量判斷

發(fā)布時(shí)間: 2023-07-07  點(diǎn)擊次數(shù): 764次

 

胎牛血清質(zhì)量如何有多種方法去進(jìn)行判斷,一種是從產(chǎn)品生產(chǎn)商提供的COA報(bào)告中檢查幾個(gè)關(guān)鍵指標(biāo)進(jìn)行判斷,二種是通過(guò)肉眼觀察物理性狀和實(shí)驗(yàn)測(cè)試其對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)的維持和促進(jìn)效果,包括接種率、生長(zhǎng)曲線、細(xì)胞特征的維持效果。

其中比較快速便捷的方法是讀懂產(chǎn)品生產(chǎn)商提供的COA,今天我們先介紹如何通過(guò)COA報(bào)告對(duì)胎牛血清進(jìn)行質(zhì)量判斷。

胎牛血清(fetal bovine serum)是一種取自牛胚胎的血清,常用于配置動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)基。胎牛血清含有各種生長(zhǎng)因子,且抗體含量少。

 

COA的作用

COA全稱Certificate of Analysis,它是廠家按照一定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范來(lái)對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行的一系列的性能指標(biāo)測(cè)試,說(shuō)人話就是:質(zhì)檢報(bào)告。

第一步,先看明白COA。

結(jié)合國(guó)家制定的標(biāo)準(zhǔn)《中國(guó)生物制品主要原輔料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn) 2000年版》針對(duì)胎牛血清最基礎(chǔ)的看明白4項(xiàng)關(guān)鍵指標(biāo)。分別是:有害微生物、內(nèi)毒素、總蛋白含量、血紅蛋白含量

 

1、COA關(guān)鍵指標(biāo) : 有害微生物

根據(jù)《中國(guó)生物制品主要原輔料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn) 2000年版》規(guī)定:牛血清制品應(yīng)過(guò)濾除菌后制成,不能含有牛腹瀉病毒,不能含有噬菌體、支原體、真菌污染。

首先,胎牛血清不能含有有害微生物,包括細(xì)菌、真菌、支原體、噬菌體和國(guó)家規(guī)定的特定病毒。

所以,任何批次的胎牛血清,其上述質(zhì)檢必須要做,而且結(jié)果必須為不能檢出。其有害微生物的檢測(cè)結(jié)果為陰性。

2、COA關(guān)鍵指標(biāo) : 內(nèi)毒素

根據(jù)《中國(guó)生物制品主要原輔料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn) 2000年版》規(guī)定:血清中細(xì)菌內(nèi)毒素含量不應(yīng)高于10 EU/ml

內(nèi)毒素來(lái)源于革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁成分,主要化學(xué)成為脂多糖LPS。當(dāng)細(xì)菌死亡溶解時(shí)釋放。內(nèi)毒素容易刺激細(xì)胞產(chǎn)生免疫反應(yīng),有一定毒性作用。

2000年版的國(guó)內(nèi)生物制品質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)明確指引了血清內(nèi)毒素含量的最高上限為10EU/ml,到了2005年的中國(guó)藥典更是將此標(biāo)準(zhǔn)提高到<5EU/ml。

3、COA關(guān)鍵指標(biāo) : 總蛋白含量

根據(jù)《中國(guó)生物制品主要原輔料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn) 2000年版》規(guī)定:血清中蛋白質(zhì)含量應(yīng)該在3.5%~5%(w/V)

這個(gè)指標(biāo)的意義在于判斷該批次胎牛血清的牛齡。

胎牛血清的采集對(duì)象是指在母牛體內(nèi)5-8個(gè)月牛齡的胎牛,隨著胎牛在母牛體內(nèi)逐步發(fā)育成熟,它的血清中的蛋白質(zhì)含量也會(huì)不斷增高。

如果蛋白質(zhì)含量太高,說(shuō)明胎牛血清采集的時(shí)間可能較晚,甚至是小牛出生后再采集的。

如果太低呢?有可能在生產(chǎn)過(guò)程中人為稀釋了血清。所以品質(zhì)好的胎牛血清,其蛋白質(zhì)含量不能太高、也不能太低。在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)即可。

4、COA關(guān)鍵指標(biāo) : 血紅蛋白


根據(jù)《中國(guó)生物制品主要原輔料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn) 2000年版》規(guī)定:血清中血紅蛋白含量不應(yīng)高于 0.02% (w/v)

 

 

         國(guó)內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)對(duì)牛血清進(jìn)行了描述定義:淺黃色、澄清、稍粘稠的液體,且無(wú)溶血、無(wú)異物。

不少同學(xué)反饋,不同批次的血清的顏色會(huì)有不同,有的偏黃、有的偏紅。市場(chǎng)上甚至還流行過(guò)通過(guò)看顏色是否紅潤(rùn)來(lái)判斷血清質(zhì)量高低的說(shuō)法。

其實(shí),胎牛血清顏色有的深有的淺,我認(rèn)為都是正?,F(xiàn)象。

因?yàn)樘ヅI形窗l(fā)育完善,因此其凝血功能不完善,所以采集血清時(shí)難以避免溶血。只要有溶血,就會(huì)出現(xiàn)血紅蛋白溢出到血清中。

決定血清色澤的因素是血紅蛋白和膽紅素,前者含量高,則呈現(xiàn)偏紅的顏色,后者高則呈現(xiàn)為金黃色。不能簡(jiǎn)單的以顏色深淺來(lái)判斷其質(zhì)量好壞。

需要注意的反而是COA中血紅蛋白含量是否在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi),因?yàn)檠t蛋白超標(biāo),意味著血清采集過(guò)程出現(xiàn)了比較嚴(yán)重的溶血現(xiàn)象。從一定程度上反映了采集流程的不規(guī)范和不嚴(yán)謹(jǐn)。

 

通過(guò)COA,可以幫助我們分析、判斷該批次血清是否存在質(zhì)量隱患。通過(guò)觀察連續(xù)批次的COA,可以判斷該品牌的血清生產(chǎn)工藝、血清品質(zhì)是否穩(wěn)定。對(duì)其中關(guān)鍵指標(biāo)例如內(nèi)毒素、血紅蛋白的分析,可以幫助我們找出日常實(shí)驗(yàn)遇到問(wèn)題的原因。例如細(xì)胞狀態(tài)好壞。

 

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